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感受态细胞感受态细胞报价;JM110感受态细胞如何制作

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一、 受体菌的培养
从LB平板上挑取新活化的E. coli JM110单菌落感受态细胞感受态细胞报价,接种于3-5ml LB液体培养基中,37℃下振荡培养12小时左右,直至对数生长后期。将该菌悬液以1:100-1:50的比例接种于100ml LB液体培养基中,37℃振荡培养2-3小时至OD600 =0.5左右。
二、 感受态细胞的制备 ( CaCl2 法)
1. 将培养液转入离心管中,冰上放置10分钟,然后于4℃下3000g离心10分钟。
2. 弃去上清,用预冷的0.05mol/L的CaCl2 溶液10ml轻轻悬浮细胞,冰上放置15-30分钟后,4℃下3000g离心10分钟。
3. 弃去上清,加入4ml预冷含15%甘油的0.05mol/L的CaCl2 溶液,轻轻悬浮细胞,冰上放置几分钟,即成感受态细胞悬液。
4. 感受态细胞分装成200μl的小份,贮存于-70℃可保存半年。

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